Comparação entre os resultados da urinálise e dosagens bioquímicas urinárias de amostras de urina coletadas pelas técnicas de cistocentese guiada por ultrassom e sondagem uretral em cães / Comparison between the results of urinalysis and urinary biochemical tests of urine samples collected by techniques ultrasound-guided cystocentesisand urethral catheterization in dogs

Objetivou-se no presente estudo comparar as técnicas de coleta de urina via sondagem uretral e cistocentese guiada por ultrassom, afim de verificar se o método de coleta pode influir nos resultados laboratoriais. Foram utilizados 12 cães machos, sem histórico de enfermidades, dos quais coletou-se cinco mililitros (mL) de urina via sondagem uretral e cinco mL via cistocentese guiada por ultrassom, ambas no mesmo momento. Posteriormente foi realizada a análise física (cor, odor, densidade, turbidez), química (urobilinogênio, glicose, corpos cetônicos, bilirrubina, proteína, nitrito, pH, sangue e leucócitos) e sedimentoscopia (avaliação de 10 campos de luz, objetiva de 40x). Cilindros urinários, cristais, corpúsculos gordurosos, espermatozoides, bactérias e células vesicais foram classificados qualitativamente como: ausentes (0), discretos (1), moderados (2) e intensos (3). Hemácias, leucócitos, e células de descamação foram quantificadas a partir da média dos campos analisados. As análises bioquímicas de microalbuminúria, creatinina e proteína total urinárias foram realizadas a partir do sobrenadante urinário, removido das amostras após centrifugação, e utilizados kits reagentes, conforme recomendação do fabricante, sendo a leitura em espectrofotômetro. Em todos os testes realizados os valores de p encontrados foram superiores 0,05 (p>0,05), excluindo-se a possibilidade de haver diferenças significativas dos resultados laboratoriais obtidos pelas duas formas de coleta.

The objective of this study was to compare two techniques of urine collection, urethral catheterization and ultrasound-guided cystocentesis, in order to verify if the collection method may influence the laboratory results. Twelve male dogs were used, with no history of diseases, of which five milliliters (mL) of urine were collected by urethral catheterization and five mL by both at the same time. Subsequently, the samples underwent physical analysis (color, smell, density andturbidity), chemical analysis (urobilinogen, glucose, ketone bodies, bilirubin, protein, nitrite, pH, blood and leukocytes) and sedimentoscopy (evaluation of 10 light fields, 40x objective). Urinary casts, fatty corpuscles, spermatozoa, bacteria and bladder epithelial cells were classified qualitatively as absent (0), discrete (1), moderate (2) and intense (3). Red blood cells, leukocytes and desquamation cells were quantified from the mean of the analyzed fields. The urine supernatants were obtained after centrifugation and were used for biochemical analyzes of microalbuminuria, urinary protein and creatinine. The reagent kits were used as recommended by the manufacturer and the samples were read by spectrophotometry. All tests presented p values higher than 0,05 (p>0,05), excluding the possibility of significant differences between the laboratory results of both forms of urine collection.

Comparação entre os resultados da urinálise e dosagens bioquímicas urinárias de amostras de urina coletadas pelas técnicas de cistocentese guiada por ultrassom e sondagem uretral em cães / Comparison between the results of urinalysis and urinary biochemical tests of urine samples collected by techniques ultrasound-guided cystocentesisand urethral catheterization in dogs

Objetivou-se no presente estudo comparar as técnicas de coleta de urina via sondagem uretral e cistocentese guiada por ultrassom, afim de verificar se o método de coleta pode influir nos resultados laboratoriais. Foram utilizados 12 cães machos, sem histórico de enfermidades, dos quais coletou-se cinco mililitros (mL) de urina via sondagem uretral e cinco mL via cistocentese guiada por ultrassom, ambas no mesmo momento. Posteriormente foi realizada a análise física (cor, odor, densidade, turbidez), química (urobilinogênio, glicose, corpos cetônicos, bilirrubina, proteína, nitrito, pH, sangue e leucócitos) e sedimentoscopia (avaliação de 10 campos de luz, objetiva de 40x). Cilindros urinários, cristais, corpúsculos gordurosos, espermatozoides, bactérias e células vesicais foram classificados qualitativamente como: ausentes (0), discretos (1), moderados (2) e intensos (3). Hemácias, leucócitos, e células de descamação foram quantificadas a partir da média dos campos analisados. As análises bioquímicas de microalbuminúria, creatinina e proteína total urinárias foram realizadas a partir do sobrenadante urinário, removido das amostras após centrifugação, e utilizados kits reagentes, conforme recomendação do fabricante, sendo a leitura em espectrofotômetro. Em todos os testes realizados os valores de p encontrados foram superiores 0,05 (p>0,05), excluindo-se a possibilidade de haver diferenças significativas dos resultados laboratoriais obtidos pelas duas formas de coleta.

The objective of this study was to compare two techniques of urine collection, urethral catheterization and ultrasound-guided cystocentesis, in order to verify if the collection method may influence the laboratory results. Twelve male dogs were used, with no history of diseases, of which five milliliters (mL) of urine were collected by urethral catheterization and five mL by both at the same time. Subsequently, the samples underwent physical analysis (color, smell, density andturbidity), chemical analysis (urobilinogen, glucose, ketone bodies, bilirubin, protein, nitrite, pH, blood and leukocytes) and sedimentoscopy (evaluation of 10 light fields, 40x objective). Urinary casts, fatty corpuscles, spermatozoa, bacteria and bladder epithelial cells were classified qualitatively as absent (0), discrete (1), moderate (2) and intense (3). Red blood cells, leukocytes and desquamation cells were quantified from the mean of the analyzed fields. The urine supernatants were obtained after centrifugation and were used for biochemical analyzes of microalbuminuria, urinary protein and creatinine. The reagent kits were used as recommended by the manufacturer and the samples were read by spectrophotometry. All tests presented p values higher than 0,05 (p>0,05), excluding the possibility of significant differences between the laboratory results of both forms of urine collection.

Hematological and biochemical characteristics during the transport of dog snapper Lutjanus jocu (Perciformes: Lutjanidae)

The objective of this study was to evaluate stress responses in dog snapper (Lutjanus jocu) during transport by evaluating their hematological and biochemical responses. Twenty-five wild dog snapper specimens were used in the experiment (220 ± 68 g and 24.5 ± 2.5 cm total length). Blood samples were collected prior to transport (control), and fish were placed in two transport boxes, one with anesthetic and one without anesthetic. Immediately after transport and after 24 h, blood was collected from the fish that underwent each treatment (with anesthetic and without anesthetic). Biochemical and hematological results demonstrated the inefficiency of benzocaine as a stress reliever during handling and transport. Biochemical parameters revealed the effects of stress during transport, and after 24 h, glucose levels and hematological parameters (hemoglobin, erythrocytes, leukocytes, neutrophils and MCH) showed a tendency to return to control levels. This study is the first to report stress response measurements of hematological and biochemical indicators in dog snapper, representing an important basis for the planning of future experiments involving the transport and handling of this fish species.(AU)

O objetivo desde estudo foi avaliar as repostas de estresse em dentão (Lutjanus jocu) durante o procedimento de transporte, através de respostas hematológicas e bioquímicas. Vinte e cinco exemplares selvagens de dentão foram utilizados no experimento (220 ± 68 g e 24.5 ± 2.5 cm de comprimento total). Foram realizadas coletas de sangue previamente ao transporte (controle), e os demais peixes foram acondicionados em duas caixas de transporte, uma com anestésico e outra sem anestésico. Imediatamente após o transporte e após 24 h, houve coleta de sangue para cada tratamento (com anestésico e sem anestésico). Os resultados bioquímicos e hematológicos apontam a ineficiência da benzocaína como mitigador do estresse durante o manuseio e transporte. Os parâmetros bioquímicos foram capazes de detectar o efeito do estresse durante o transporte, e após 24 h os níveis de glicose e alguns parâmetros hematológicos (hemoglobina, eritrócitos, leucócitos, neutrófilos e MCH) demonstraram uma tendência de retorno aos níveis do controle. Este trabalho é o primeiro a informar os níveis de resposta basal e de estresse para indicadores hematológicos e bioquímicos em dentão, representando uma base importante para o planejamento de futuras experiências com transporte e manejo dessa espécie.(AU)

Efeitos do polietilenoglicol 3350 e de soluções acidificantes e alcalinizantes sobre o perfil bioquímico de éguas hígidas / Effects of polyethylene glycol 3350 and alkalizing and acidifying solutions on the biochemical profile of healthy mares

Avaliou-se o perfil bioquímico de cinco éguas hígidas tratadas com polietilenoglicol 3350 (PEG); ou com polietilenoglicol 3350+Ringer lactato (PEG+RL); ou com solução isotônica poliônica enteral (SIPE); ou com solução isotônica poliônica enteral associada ao Ringer lactato intravenoso (SIPE+RL); ou com solução de cloreto de sódio a 0,9% (NaCl 0,9%). Os parâmetros avaliados foram: sódio, cloreto, potássio, cálcio ionizado, fósforo, magnésio total, proteínas totais, albumina, creatinina, ureia e osmolaridade calculada no soro de sangue venoso. O tratamento PEG não alterou os parâmetros bioquímicos. O PEG+RL diminuiu o fósforo. O SIPE diminuiu o fósforo e aumentou o cloreto. O SIPE+RL aumentou o sódio, e o NaCl 0,9% ocasionou o aumento do cloreto e a redução da osmolaridade sérica. Concluiu-se que o tratamento PEG associado ao Ringer lactato pode provocar o aparecimento de hipofosfatemia, o SIPE ocasiona hipercloremia, o NaCl 0,9% diminui a osmolaridade sérica e o SIPE+RL provoca hipernatremia.

The biochemical profile of five healthy mares treated with polyethylene glycol 3350 (PEG); or polyethylene glycol 3350+Ringer lactate intravenous (PEG+RL); or enteral polionic isotonic solution (EPIS); or enteral polionic isotonic solution associated with Ringer lactate intravenous (EPIS+RL); or chloride sodium solution 0.9% (NaCl 0.9%) was evaluated. The parameters evaluated were: sodium, chloride, potassium, ionized calcium, phosphorus, total magnesium, total protein, albumin, creatinine, urea, and calculated serum osmolality of venous blood. PEG treatment did not alter biochemical parameters. PEG+RL decreased phosphorus. SIPE decreased phosphorus and increased chloride. The EPIS+RL caused an increase of sodium and NaCl 0.9% caused an increase of chloride and a reduction of serum osmolarity. It is concluded that PEG treatment associated with Ringer lactate solution can cause the appearance of hypophosphatemia, EPIS causes hyperchloremia, NaCl 0.9% decreases the serum osmolality and EPIS+RL causes hypernatremia.

Mecanismos moleculares da ação tóxica pró-oxidante de 1,4-diamino-2-butanona, um análogo de putrescina, sobre células de mamíferos e Trypanosoma cruzi / The Molecular mechanisms of pro-oxidant activity of 1,4-diamino-2-butanone, a putrescine analogue, to mammalian cells and Trypanosoma cruzi

Compostos α-aminocarbonilícos como ácido 5-aminolevulínico (ALA) e aminoacetona (AA) apresentam um grande potencial pró-oxidante, pois sofrem reações de enolização e subseqüente oxidação aeróbica, com a formação de espécies radicalares de oxigênio, íons NH4+ e α-oxoaldeídos potencialmente citotóxicos. A α-aminocetona 1,4-diamino-2-butanona (DAB), um análogo da putrescina, é um agente microbicida de vários parasitas incluindo Trypanosoma cruzi. Acredita-se que o mecanismo de morte desencadeado por DAB nos parasitas seja por meio da inibição competitiva da ornitina descarboxilase (ODC), importante enzima do metabolismo de poliaminas, muito embora tenha sido observado de igual forma danos oxidativos nestes parasitas quando tratados com DAB. O objetivo deste trabalho é esclarecer o mecanismo de oxidação química de DAB e sua ação pró-oxidante à cultura de células de mamíferos (LLC-MK2 e RKO), assim como sua atividade microbicida contra tripomastigotas de Trypanosoma cruzi. Demonstramos aqui que DAB, quimicamente similar ao ALA e AA, sofre reação de oxidação catalisada por íons fosfato, e por íons de metais de transição como Fe(II) e Cu(II), resultando na formação de radicais de oxigênio, H2O2, NH4+, 2-oxo-4-aminobutanal como produto principal da oxidação de DAB e de compostos ciclicos de caracter pirrólico. Danos oxidativos observados em ferritina, apotransferrina e liposomos de cardiolipina e fosfatidilcolina (20:80) contribuem para a nossa hipótese de ação pró-oxidante de DAB. O tratamento de células de mamíferos das linhagens LLC-MK2 (IC50 1,5 mM, tratamento de 24 h) e RKO (IC50 0,3 mM, tratamento de 24 h) com DAB levou à alteração do balanço redox celular, à ativação de resposta antioxidante e ao desencadeamento de morte celular via apoptose e parada de ciclo celular. Em culturas de tripomastigotas de T. cruzi o tratamento com DAB culminou na redução da motilitidade e viabilidade destes parasitas (IC50 0,2 mM, tratamento de 4 h), assim como depleção do...

α-Aminocarbonyl componds such as 5-aminolevunilic acid (ALA) and aminoacetone (AA) have been shown to exhibit pro-oxidant properties. These compounds undergo phosphate-catalyzed enolization in physiological pH and subsequent aerobic oxidation, yielding reactive oxygen species, NH4+ ions and an α-oxoaldehyde highly cytotoxic. The α-aminoketone 1,4-diamino-2-butanone (DAB) is a putrescine analogue and a microbicidal agent to various parasites including Trypanosoma cruzi. The mechanism of DAB toxicity to these parasites is attributed to DAB competitive inhibition of ornithine decarboxylase (ODC), a key enzyme on polyamine biosynthesis, although it has also been shown DAB isto implicated in oxidative damage to these parasites. Our aim is to clarify the mechanism of DAB aerobic oxidation and of its putative pro-oxidant activity to mammalian cell cultures (LLC-MK2 and RKO cell linages) and to Trypanosoma cruzi trypomastigotes. Here we show that, similar to ALA and AA, DAB undergoes aerobic oxidation in presence of phosphate ions and of transition metal ions such as Fe(II) and Cu(II), yielding oxygen radicals, H2O2, NH4+ and 2-oxo-4-aminobutanal accompanied by its condensation cyclic products displaying pyrrolic characteristics. Oxidative alterations to ferritin, apotransferrin and liposomes of cardiolipin and phosphatidylcholine (20:80) were observed under DAB treatment strongly supporting our hypothesis of DAB pro-oxidative activity. DAB treatment of mammalian cultured cells LLC-MK2 (IC50 1.5 mM, 24 h incubation) and RKO (IC50 0.3 mM, 24 h incubation) resulted in redox imbalance, induction of antioxidant response, activation of apoptosis pathway and cell cycle arrest. DAB is shown here to trigger Trypanosoma cruzi trypomastigotes decreased parasite motility and viability (IC50 0.2 mM, 4 h incubation), as well as redox thiol imbalance parallel to increase TcSOD activity. In addition, DAB efficiently hampered host cell (LLC-MK2) invasion by trypomastigotes...

Acetilação radicalar de amino ácidos, peptídeos e nucleobases pelos sistemas biacetilo/peroxinitrito e metilglioxal/peroxinitrito / Radical acetylation of aminoacids, peptides, and nucleobases by the biacetyl or methylglyoxal/peroxynitrite systems

Biacetilo (2,3-butanediona) é um contaminante de comida e cigarro, também implicado na hepatoxicidade do álcool e em doenças pulmonares. O metilglioxal (MG), um α-oxoaldeído reativo frequentemente associado ao diabetes e envelhecimento, é produto da fragmentação oxidativa de trioses fosfato, acetona e aminoacetona. Por sua vez, peroxinitrito - um potente oxidante, agente nitrante e nucleófilo formado in vivo pela reação controlada por difusão do ânion radical superóxido com o radical óxido nítrico (k ~1010 M-1s-1) é capaz de se adicionar a CO2 e compostos carbonílicos, gerando produtos potencialmente tóxicos ou sinalizadores celulares. Aminoácidos, peptídeos e nucleobases podem ser acetilados nos grupos amina e na porção desoxiribose. Relativamente ao tratamento com peroxinitrito isolado, níveis superiores de 3-nitrotirosina foram detectados quando tirosina foi tratada com peroxinitrito/biacetilo ou metilglioxal. Ambos os grupos amina de lisina (Lys) ou um deles de derivados de lisina bloqueados e um deles (Ac-Lys-OMe, Z-Lys-OMe) foram acetilados pelo sistema biacetilo ou metilglioxal/peroxinitrito. Em tetrapeptídeos sintéticos contendo lisina como aminoácido amino-terminal (H-KALA-OH, Ac-KALA-OH and H-K(Boc)ALA-OH), a lisina foi acetilada pelo sistemas dicarbonilico/peroxinitrito no grupo α-amina (em maior extensão) e/ou no ε-amina (em menor extensão). No conjunto, estes resultados podem ser interpretados à luz do mecanismo proposto para a reação de compostos α-dicarbonílicos com peroxinitrito, o qual envolve sequencialmente: (i) adição nucleofílica de peroxinitrito à carbonila; (ii) homólise do aduto peroxinitroso formado, liberando •NO2 e um radical oxila do reagente carbonílico; (iii) β-clivagem do radical oxila a um ácido carboxílico (ácido acético no caso de biacetilo e ácido fórmico, a partir de metilglioxal) e radical acetila; (iv) captação do radical acetila pelo oxigênio molecular dissolvido dando acetato, ou por aminoácido ou nucleobase...

Diacetyl (2,3-butanedione) is a food and cigarette contaminant recently implicated in alcohol hepatotoxicity and lung disease. In turn, methylglyoxal (MG) is an α-oxoaldehyde frequently associated with diabetes and aging that is putatively formed by the oxidative fragmentation of trioses phosphate, acetone and aminoacetone. Peroxynitrite - a potent oxidant, nitrating agent and nucleophile formed in vivo by the diffusion-controlled reaction of superoxide radical with nitric oxide (k ~1010 M-1s-1) - is able to form adducts with carbon dioxide and carbonyl compounds. When initially present in the reaction mixtures before addition of ONOO-, amino acids, peptides and nucleobases undergo acetylation at the amino group and purine moieties in the presence of biacetyl or methylglyoxal. Higher levels of 3-nitrotyrosine nitration were measured when peroxynitrite/biacetyl or metilglioxal was added to tyrosine, in comparison with peroxynitrite alone. Both amino groups of L-lysine or one of the amino groups of L-lysine derivatives (Z-Lys-OH and Ac-Lys-OH) were acetylated by biacetyl and methylglyoxal/peroxynitrite system. Using tetrapeptides containing lysine at the terminal amino acid (H-KALA-OH, Ac-KALA-OH and H-K(Boc)ALA-OH), the lysine residue was acetylated at both or either α-amino (major adduct) and ε-amino group (minor adduct). Altogether these data can be interpreted by the mechanism proposed to describe the reaction of α-dicarbonyls with peroxynitrite as follows: (i) nucleophilic addition of peroxynitrite to the carbonyl group of the reagent; (ii) homolysis of the formed peroxynitroso carbonyl adduct to •NO2 and a carbonyloxyl radical; (iii) β-cleavage of the oxyl radical to acetyl radical plus acetic acid (from diacetyl) or formic acid (from methylglyoxal); (iv) competitive scavenging of the acetyl radical by dissolved molecular oxygen and by added amino acid, peptide or nucleobase, ultimately yielding acetate or acetylated biomolecule. If occurring in vivo...

Avaliação da atividade antioxidante da romã (Punica granatum, L. ) - participação das frações de ácidos fenólicos no processo de inibição da oxidação / Evaluation of the antioxidant activity of the pomegranate (Punica granatum, L. ) - participation of the phenolic acids fractions on the inhibition of the oxidation´s process

Os antioxidantes de origem natural têm importância na área de alimentos, pois podem representar uma alternativa de substituição aos antioxidantes sintéticos. Os compostos fenólicos, presentes nos vegetais, desempenham importância na inibição da oxidação, A romã (Punica granatum, L.) é rica em compostos fenólicos como as antocianinas, flavonóides e ácidos fenólicos. Avaliou-se a atividade antioxidante da polpa e semente de romãs plantadas no Brasil (Pernambuco), e foi feita a obtenção dos extratos e frações de ácidos fenólicos da fruta, que foram submetidos aos testes de co-oxidação de substratos β- caroteno e ácido linoléico, em meio emulsionado, e ao método Rancimat, em meio lipídico. Também foi avaliado o comportamento cinético da atividade antioxidante para os extratos e frações de ácidos fenólicos. Verificou-se que os extratos aquosos da polpa e semente apresentaram significativa inibição da oxidação a concentrações baixas, em ambos os testes utilizados, fato atribuído à grande quantidade de compostos fenólicos presentes nestes extratos, em relação aos demais. A avaliação cinética dos extratos aquosos demonstrou que estes também foram mais eficientes ao longo do processo oxidativo, apresentando-se mais estáveis do que o antioxidante sintético BHT. As frações de ácidos fenólicos esterificados a compostos solúveis da polpa foi a fração que apresentou maior inibição da oxidação, e também maior quantidade de compostos fenólicos, apresentando uma atividade cinética bastante eficiente. Entretanto, as frações de ácidos fenólicos livres da polpa e semente apresentaram porcentagens de inibição da oxidação bastante altas a uma concentração menor. A semente da romã apresenta em sua composição de ácidos graxos o ácido graxo punícico. Este ácido é um isômero conjugado do ácido linolênico, e que constitui 58% da composição total de ácidos graxos da semente da fruta, sendo seu principal ácido graxo.

The antioxidants of natural origin have an important role on food science, because they may substitute the synthetic antioxidants. The phenolic compounds of vegetables play an important role as oxidation inhibitors. The pomegranate (Punica granatum, L.) is rich in phenolic compounds as anthocianins, flavonoids and phenolic acids. The antioxidant activity of extracts and acid phenolic fractions obtained from the pulp and seeds of brazilian pomegranate (from Pernambuco) was evaluated, by the co-oxidation of β-carotene and linoleic acid assay and the Rancimat method. The kinetic behavior of the antioxidant activity of the extracts and acid phenolic fractions by the co-oxidation of β-carotene and linoleic acid test was evaluated, too. It was noted that the aquous extracts from the pulp and seeds have significant antioxidant activity at slow concentration. It was possible by the high content of phenolic compounds present on those extracts. The kinetic behavior showed that the aquous extracts was the most efficient along the oxidative process, showing larger stability than the antioxidant BHT. The pulp's of bound acid phenolic fraction by soluble compounds was the most efficient among the acid phenolic fractions, and it has major amount of phenolic compounds. The pomegranate seed has the punicic acid on its fatty acid composition. The punicic acid is a I conjugated inolenic acid isomer.The punicic acid is present at 58% from the total fatty acids from the fruit, being its principal fatty acid.

Neoangiogenese na aterosclerose: modulacao por lipides nitrados / Neoangiogenesis in atherosclerosis: modulation through nitrated lipids

Lípides nitrados (NO₂-FA) são apontados como uma nova classe de mediadores lipídicos, podendo atuar como reservatórios endógenos de Oxido nítrico (^.NO) bem como moduladores pluripotentes de sinalização celular. Recentemente, tem sido sugerido que os doadores de ^.NO estariam envolvidos na regulação da angiogênese. Evidências contundentes indicam ainda que o processo de neovascularização poderia contribuir para a patogênese de uma serie de condições clínicas, entre elas a aterosclerose. Contudo, apesar de diversos estudos terem explorado os efeitos biológicos dos NO₂-FA, os efeitos destes compostos sobre o processo de angiogênese não haviam sido descritos. Dessa maneira, o presente trabalho investigou os efeitos dos NO₂-FA (derivados da nitração do acido linoléico e oléico) no processo de angiogênese. Demonstrou-se que os NO₂-FA podem atuar como mediadores pro-angiogênicos. Este efeito foi caracterizado em células endoteliais humanas, assim como, em modelos ex vivo e in vivo. Nas células endoteliais, observou-se que os NO₂-FA não influenciaram a proliferação ou a viabilidade celular, ao passo que estimularam a migração. Demonstrou-se também que os NO₂-FA podem modular o brotamento ex vivo de novos vasos, em cultura de anéis de aorta de rato, bem como o processo angiogênico in vivo observado na membrana corioalantóica de embrião de galinha. Adicionalmente, os NO₂-FA induziram a expressão do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), que é o principal mediador do processo de angiogênese. Em relação ao mecanismo de ação, os achados sugerem que os efeitos demonstrados seriam via mecanismos dependentes de ^.NO, uma vez que foram abolidos na presença de um seqüestrador de ^.NO, enquanto concentrações equivalentes dos Lípides precursores não demonstraram qualquer influência nas condições experimentais utilizadas neste estudo...

Nitrated lipids ( NO₂-FA) are described as a new class of lipid mediators that are able to act as endogenously nitric oxide ( ^.NO) reservoirs as well as pluripotent cell signaling modulators. Furthermore, recent findings suggest that ^.NO donors could be involved in the regulation of angiogenesis. Compelling evidence also indicate that the neovascularization process might contribute to the pathogenesis of many clinical conditions, such as atherosclerosis. However, although several studies have explored the NO₂-FA biological properties, the effects of these compounds on the angiogenic process remain unknown. Hence, the present study investigated the effects of the NO₂-FA (derivates from the nitration of linoleic and oleic acids at physiological concentrations) on angiogenesis process. It is demonstrated that the NO2-FA could act as pro-angiogenic mediators. This effect was observed not only in human endothelial cells but also in ex vivo and in vivo models. Using endothelial cells, it is showed that NO₂-FA failed to affect cell proliferation or influence cellular viability, but significantly stimulated cell migration. It was also found that the NO₂-FA might modulate the ex vivo sprouting of new vessels as well as the in vivo angiogenic process, while inducing the expression of the vascular endothelial growth factor, the main mediator of angiogenesis. The data are consistent with the hypothesis that the observed effects mediated by NO-dependent mechanisms, since the presence of a ^.NO scavenger abrogated the induced effects, whereas equimolar concentrations of its precursors, showed no effect on angiogenesis under our experimental conditions. Finally, the pro-angiogenic effects of NO2-FA were mediated by the stabilization of the hypoxia inducible factor-l1á (HIF-1á) protein, because these compounds increased the protein amount and failed to show inductive effects...

Avaliação comparativa de características estruturais do amido e enzimas relacionadas à sua degradação em cultivares de banana como padrão distinto do modelo representado pela cultuvar Nanicão / Comparative evaluation of structural characteristics of starch and enzymes related to their degradation in banana cultivars as distinct from the standard model represented by cultuvar Nanicão

O acúmulo de açúcares solúveis observados em banana madura é resultado da ação de diversas enzimas que atuam sob o amido acumulado durante o seu desenvolvimento. Este processo pode ocorrer fora da planta e, em um período relativamente curto conhecido como amadurecimento. A rápida mobilização associado a escassez de trabalhos que enfoquem o processo de degradação de amido em Orgãos que armazenam amido temporariamente, como bananas, o objetivo desse estudo foi localizar cultivares que se comportem diferente do modelo Nanicão, que é objeto de estudo do laboratório ha muito tempo, sendo por isso, a cultivar mais conhecida e estudada. Bananas pertencentes a diferentes grupos genômicos foram selecionadas e analisadas, sendo elas: Nanicão (AAA), Terra (AAB), Mysore (AAB), Pacovan (AAB) e Figo (ABB). Quanto aos parâmetros de amadurecimento analisados, as cultivares Nanicão, Terra e Pacovan tiveram um comportamento climatérico típico. A sacarose foi o açúcar predominante em todas as cultivares seguida pela glicose e frutose que mantiveram uma proporção 1:1. A cultivar Nanicão teve maiores teores de açúcares solúveis seguida pela Figo, Pacovan, Terra e Mysore. Em extrato bruto de banana, os maiores valores de atividade da β-amilase foi verificada nos estágios finais do amadurecimento, enquanto que a da α-amilase foi, praticamente, constante durante o período analisado, com exceção da Figo. Para detectar a presença das amido-fosforilases foi realizado ensaio, em extrato bruto de banana, de eletroforese em condições não-desnaturantes (PAGE-nativo) e, duas bandas com atividade foram visualizadas nas cultivares, com exceção da Mysore. O inicio do processo de degradação de amido ocorreu anterior a produção autocatalitica de etileno e, as cultivares tiveram diferentes percentuais de degradagao de amido, sendo os maiores obtidos/na Pacovan seguida pela Mysore, Nanicão, Figo e Terra. Os grânulos de amido das cultivares Terra e Figo mostraram-se resistentes a...

The soluble sugars accumulation in mature banana is consequence of several enzymes action on accumulate starch obtained during its development process. The starch degradation can occur outside the plant in a relatively short time called ripening. Associate at the faster starch mobilization, few works are available focusing this process in organs that store starch temporarily like banana. The aim of this study was identified cultivars that show different pattern of starch degradation when compared with Nanicao model. Bananas of different genomic groups were selected and analyzed, Nanicao (AAA), Terra (AAB), Mysore (AAB), Pacovan (AAB) and Figo (ABB). The Nanicao, Terra and Pacovan cultivars had a typical climacteric behavior. Sucrose was the predominant sugar followed by glucose and fructose that maintained 1:1 ratio, in all cultivars. Nanicao had the higher levels of soluble sugars followed by Figo, Pacovan, Terra and Mysore. The onset of starch degradation seems to be independent of ethylene. The higher activities of β-amylase, in banana pulp, was obtained in the last ripening stages, while α-amylase activities was constant and low at Nanicao and Pacovan. Two bands with activities were visualized in native PAGE which corresponded to cytosolic and plastidial forms of starchphosphorylases, with exception of Mysore. All cultivars had different perceptual of starch degradation and the higher one was observed at Pacovan, followed by Mysore, Nanicao, Figo and Terra. Starches granules of Terra and Figo showed to be resistant to enzymatic hydrolysis. All cultivars had a and β-amylase activities associated to granule throughout the ripening process. Only Mysore showed αamylase activity associated to granule higher than β-amylase. No significant change along the ripening was observed in amylose content and amylopectin chain length distribution. The micrographs revealed that granule surface suffer changes along the ripening, exposing structures...